紫外分光光度計的原理

物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(cháng)的光能量,相應地發(fā)生了分子振動(dòng)能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會(huì )相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線(xiàn)，可根據吸收光譜上的某些特征波長(cháng)處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結構和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

紫外可見(jiàn)分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即.物質(zhì)在--定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。物質(zhì)的顏色和它的電子結構有密切的關(guān)系，當輻射(光子)引起電子躍遷使分子(或離子)從基態(tài)_上升到激發(fā)態(tài)時(shí)，分子(或離子)就會(huì )在可見(jiàn)區或紫外呈現吸光，顏色的發(fā)生或變化是和分子的正常電子結構的變形聯(lián)系的。當分子中含有一個(gè)或更多的生色基因(即具有不飽和鍵的原子基團),輻射就會(huì )引起分子中電子能量的改變。常見(jiàn)的生色團有:CO， -N=N-， -N=O，-C N, CS

如果兩個(gè)生色團之間隔一個(gè)碳原子，則形成共軛基團，會(huì )使吸收帶移向較長(cháng)的波長(cháng)處(即紅移)，且吸收帶的強度顯著(zhù)增加。當分子中含有助色基團(有未共用電子對的基團)時(shí)，也會(huì )產(chǎn)生紅移效應。常見(jiàn)的助色基團有: -0H -NH2，-SH,-C1，-Br，-I。